1、動物組織:主要原料為雞冠和牛眼玻璃體等。用丙酮或乙醇將原料脫脂、脫水，用蒸餾水浸泡、過濾，隨后用氯化鈉水溶液和氯仿溶液處理，隨后加胰蛋白酶保溫后得到混合液，最后用離子交換劑處理、純化得到精制的玻尿酸。該方法提取率極低，僅1%左右，分離過程復雜，玻尿酸價格高，達5000美元/公斤，限制化妝品大量使用。

2、微生物發(fā)酵：以葡萄糖作為碳源發(fā)酵液。在培養(yǎng)基中發(fā)酵48小時，發(fā)酵結束后，過濾去除菌絲和雜質，通過酒精沉淀法等簡單操作獲得高純度的產物。采用發(fā)酵法制造的透明質酸，優(yōu)點是能按商品設計來設定分子量大小。發(fā)酵法的關鍵是菌種的選擇，多選擇鏈球菌、乳酸球菌等。

3、化學合成:采用天然酶聚合反應，首先使用多糖聚合物合成透明質酸氧氮雜環(huán)戊烯衍生物，添加水分解酶，制作衍生物和酶復合體，最后在90度攝氏反應液中去除酶，合成透明質酸。采用人工合成法可以大大降低玻尿酸的制造成本，但結構不純。