免疫組化檢查是一種通過抗原抗體反應(yīng)定位組織或細(xì)胞中特定蛋白質(zhì)的病理學(xué)檢測(cè)技術(shù),主要用于腫瘤診斷、分型及治療靶點(diǎn)篩選。
免疫組化利用抗體與抗原特異性結(jié)合的特性,通過化學(xué)顯色標(biāo)記目標(biāo)蛋白。將組織切片與一抗孵育后,加入酶標(biāo)記二抗形成復(fù)合物,最終底物顯色可精確定位靶蛋白分布。該技術(shù)能保持組織結(jié)構(gòu)完整性,實(shí)現(xiàn)蛋白水平的形態(tài)學(xué)觀察。
臨床主要應(yīng)用于惡性腫瘤鑒別診斷,如通過細(xì)胞角蛋白確認(rèn)上皮源性腫瘤,CD20標(biāo)記B細(xì)胞淋巴瘤。在乳腺癌中檢測(cè)ER/PR受體指導(dǎo)內(nèi)分泌治療,HER2過表達(dá)提示靶向治療適應(yīng)癥。部分感染性疾病也可通過檢測(cè)病原體抗原輔助診斷。
標(biāo)準(zhǔn)操作包括組織固定、石蠟包埋、切片脫蠟水化后,進(jìn)行抗原修復(fù)消除甲醛交聯(lián)影響。依次加入一抗、二抗及顯色系統(tǒng),最后復(fù)染細(xì)胞核。關(guān)鍵環(huán)節(jié)需設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照,防止假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果。
陽(yáng)性信號(hào)表現(xiàn)為棕黃色顆粒,需評(píng)估染色強(qiáng)度與陽(yáng)性細(xì)胞比例。半定量評(píng)分系統(tǒng)如乳腺癌HER2檢測(cè)采用0-3+分級(jí)。部分指標(biāo)需結(jié)合亞細(xì)胞定位判斷,如p53核陽(yáng)性提示突變型,而胞質(zhì)陽(yáng)性可能為野生型。
相比基因檢測(cè)具有成本低、周期短優(yōu)勢(shì),可同時(shí)觀察多個(gè)標(biāo)記物共表達(dá)情況。多重免疫組化新技術(shù)能實(shí)現(xiàn)單張切片6-8種蛋白共檢測(cè)??臻g轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合應(yīng)用可獲取蛋白與基因表達(dá)雙重信息。
接受免疫組化檢查后,患者應(yīng)關(guān)注病理報(bào)告中的關(guān)鍵指標(biāo)解讀,特別是治療相關(guān)生物標(biāo)志物結(jié)果。檢測(cè)前避免使用影響抗原性的藥物,標(biāo)本取材后需及時(shí)固定防止蛋白降解。對(duì)于復(fù)雜病例建議結(jié)合分子檢測(cè)綜合判斷,定期復(fù)查監(jiān)測(cè)標(biāo)志物動(dòng)態(tài)變化。
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