支原體藥敏試驗(yàn)通常通過(guò)采集分泌物或組織樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和藥物敏感性檢測(cè)。主要有咽拭子培養(yǎng)、尿液抗原檢測(cè)、血清抗體檢測(cè)、PCR核酸擴(kuò)增、微量肉湯稀釋法等方法。
使用無(wú)菌棉簽在患者咽后壁反復(fù)擦拭獲取分泌物樣本,將樣本接種于專用支原體培養(yǎng)基中。該方法操作簡(jiǎn)便但培養(yǎng)周期較長(zhǎng),需3-7天才能觀察到支原體菌落生長(zhǎng)。培養(yǎng)陽(yáng)性后可進(jìn)一步進(jìn)行藥敏試驗(yàn),常用培養(yǎng)基包括PPLO肉湯和SP4瓊脂。
采集晨起首次排尿的中段尿10-15毫升,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)尿液中支原體特異性抗原。該方法適用于泌尿生殖道支原體感染檢測(cè),具有非侵入性優(yōu)勢(shì),但靈敏度受尿液稀釋度影響。陽(yáng)性樣本可配合微量稀釋法進(jìn)行后續(xù)藥敏分析。
抽取靜脈血2-3毫升分離血清,采用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)或顆粒凝集試驗(yàn)檢測(cè)支原體特異性IgM和IgG抗體。該方法主要用于肺炎支原體感染的輔助診斷,抗體效價(jià)變化可反映感染進(jìn)程,但無(wú)法直接指導(dǎo)用藥,需結(jié)合其他檢測(cè)方法綜合判斷。
通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)擴(kuò)增支原體16S rRNA或特定耐藥基因片段。該方法靈敏度高,3-5小時(shí)即可出結(jié)果,能同時(shí)檢測(cè)多種支原體亞型及其耐藥基因突變。陽(yáng)性結(jié)果可提示臨床潛在耐藥風(fēng)險(xiǎn),但需培養(yǎng)法補(bǔ)充驗(yàn)證實(shí)際藥物敏感性。
將純化培養(yǎng)的支原體菌株接種于含梯度濃度抗生素的液體培養(yǎng)基,觀察48-72小時(shí)生長(zhǎng)抑制情況。該方法為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)藥敏試驗(yàn),可測(cè)定支原體對(duì)四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類等8-12種抗生素的最低抑菌濃度,結(jié)果以敏感、中介或耐藥三級(jí)報(bào)告。
進(jìn)行支原體藥敏試驗(yàn)前應(yīng)避免使用抗菌藥物3天以上,采樣時(shí)注意無(wú)菌操作防止污染。不同檢測(cè)方法各有側(cè)重,臨床常需聯(lián)合應(yīng)用以提高準(zhǔn)確性。獲取藥敏報(bào)告后應(yīng)在醫(yī)生指導(dǎo)下選擇敏感抗生素,完成規(guī)定療程,期間避免擅自調(diào)整用藥。治療期間建議多飲水保持排尿通暢,注意休息和營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充,避免辛辣刺激食物。
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