維生素D3建議在早餐或午餐后服用，此時吸收效果較好。維生素D3的服用時間主要與飲食結構、個體代謝差異、藥物相互作用、日照時間、胃腸功能等因素有關。
早餐后服用維生素D3有助于與食物中的脂肪共同吸收，脂溶性維生素D3在脂肪參與下吸收率會提升。部分人群因工作原因早餐較簡單，可選擇在午餐后補充，此時飲食中脂肪含量通常較高。與鈣劑同服時需間隔一定時間，避免影響吸收效率。長期夜間工作者因日照不足，可在白天任意餐后補充。胃腸功能較弱者分次小劑量服用可減少刺激。
空腹服用可能導致吸收率下降，但若與其他藥物存在相互作用則需調整時間。某些降壓藥或抗癲癇藥與維生素D3同服可能降低藥效，需間隔數(shù)小時。極少數(shù)對脂肪吸收障礙的患者需在醫(yī)生指導下調整劑型或時間。孕婦及哺乳期女性對維生素D3需求較高，可遵醫(yī)囑增加補充次數(shù)。
日常補充維生素D3期間應保持適度日照，每周2-3次在上午10點前或下午3點后暴露四肢皮膚15-30分鐘，同時注意監(jiān)測血清維生素D水平。肥胖人群及深色皮膚者可能需要更高劑量，但需通過醫(yī)學檢測確定。長期服用超過推薦劑量可能導致血鈣升高，出現(xiàn)食欲減退或心律失常等癥狀時應及時就醫(yī)。儲存維生素D3需避光密封，避免與氧化劑類物質共同存放。