免疫組化主要通過組織樣本處理、抗原修復(fù)、抗體孵育、顯色觀察等步驟完成。免疫組化是病理診斷中常用的技術(shù)手段，主要用于檢測組織中特定蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。
免疫組化的第一步是組織樣本處理，需要將待檢組織進(jìn)行固定、脫水、包埋和切片，通常使用甲醛固定石蠟包埋的組織切片。固定可以保持組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，脫水包埋便于切片保存。第二步是抗原修復(fù)，由于固定過程可能導(dǎo)致抗原表位被掩蓋，需要通過加熱或酶處理使抗原重新暴露。常用的抗原修復(fù)方法有高壓熱修復(fù)和微波熱修復(fù)。第三步是抗體孵育，先將一抗與組織切片孵育，一抗會特異性結(jié)合目標(biāo)抗原，再使用標(biāo)記的二抗與一抗結(jié)合。常用的標(biāo)記物有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶。第四步是顯色觀察，加入顯色底物后，標(biāo)記酶催化底物產(chǎn)生有色沉淀，通過顯微鏡觀察染色結(jié)果。染色強(qiáng)度反映目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。整個(gè)操作過程需要嚴(yán)格控制溫度、時(shí)間和試劑濃度，避免非特異性染色。免疫組化結(jié)果需由專業(yè)病理醫(yī)師結(jié)合組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行判讀。
進(jìn)行免疫組化檢查前應(yīng)避免使用影響免疫反應(yīng)的藥物，檢查后注意保持穿刺部位清潔干燥。免疫組化結(jié)果對疾病診斷和治療方案制定有重要指導(dǎo)意義，建議在醫(yī)生指導(dǎo)下配合完成相關(guān)檢查，并根據(jù)檢查結(jié)果采取相應(yīng)診療措施。日常應(yīng)注意規(guī)律作息和均衡飲食，避免過度勞累，有助于維持正常免疫功能。