核酸檢測哪些情況下會呈現(xiàn)假陽性?導(dǎo)致核酸假陽性的原因有哪些
核酸檢測一般不會出現(xiàn)假陽性,出現(xiàn)假陽性的主要原因多是因為標(biāo)本污染,主要有以下幾種情況可能會導(dǎo)致核酸檢測出現(xiàn)假陽性:
1、標(biāo)本污染
如果工作人員在收集標(biāo)本時容器被污染,或者在放置標(biāo)本時,如果容器密封不嚴(yán)病毒外泄,容器與容器之間會發(fā)生相互交叉污染。其次相關(guān)工作人員在提取核酸模板時,如果加樣器污染也會導(dǎo)致要本間發(fā)生污染的情況發(fā)生。
2、氣溶膠污染
空氣與離心機(jī)離心和液體表面進(jìn)行摩擦?xí)r,由于操作比較劇烈,這次如果相關(guān)工作人員在反復(fù)吸樣和開蓋時就會導(dǎo)致氣容膠發(fā)生污染。其次氣溶膠中的小顆粒會分散在實驗室的空氣中,可能會落到PCR儀、驗臺面、吸頭盒等地方,形成叉感染。
3、實驗室中克隆質(zhì)粒污染
實驗室中的克隆質(zhì)粒在被純化時需要的用具和試劑比較多,在活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)粒,活細(xì)胞的繁殖速度更快,其生命力更強(qiáng),如果此時造成污染,那么也會導(dǎo)致核酸檢測假陽性。
4、PCR試劑污染
PCR試劑在調(diào)配的過程中,有可能被雙蒸水、加樣槍、容器等污染導(dǎo)致核酸出現(xiàn)假陽性的情況。
5、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染
PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染是一種最常見的污染問題,PCR產(chǎn)物的拷貝量大于1013copy/mL,即使被很少量的PCR產(chǎn)物污染,就會導(dǎo)致假陽性的發(fā)生。
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