大腸桿菌革蘭氏染色通常呈陰性反應(yīng),表現(xiàn)為紅色或粉紅色。革蘭氏染色是細(xì)菌分類的常用方法,通過染色反應(yīng)可將細(xì)菌分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩大類。
大腸桿菌屬于革蘭氏陰性菌,其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)較薄且含有脂多糖層,在革蘭氏染色過程中,經(jīng)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,酒精脫色會溶解外膜的脂質(zhì),使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被洗脫,最終經(jīng)沙黃或復(fù)紅復(fù)染呈現(xiàn)紅色。這種染色特性與革蘭氏陽性菌如金黃色葡萄球菌形成明顯對比,后者因具有厚肽聚糖層而保留紫色。大腸桿菌的革蘭氏陰性特征與其致病性相關(guān),脂多糖層可引發(fā)宿主免疫反應(yīng),導(dǎo)致發(fā)熱等炎癥癥狀。臨床實驗室通過該染色法可快速初步鑒別細(xì)菌類型,為感染診斷提供依據(jù)。染色結(jié)果需結(jié)合菌落形態(tài)、生化試驗等進(jìn)一步確認(rèn),避免因脫色時間不當(dāng)?shù)燃夹g(shù)因素造成假陰性或假陽性。
在臨床標(biāo)本檢測中,規(guī)范的革蘭氏染色操作對結(jié)果準(zhǔn)確性至關(guān)重要。建議使用新鮮培養(yǎng)的菌落進(jìn)行染色,脫色時間控制在5-10秒,過度脫色可能導(dǎo)致革蘭氏陽性菌假陰性。染色后的玻片需用油鏡觀察,注意區(qū)分細(xì)菌形態(tài)和染色均勻度。實驗室人員應(yīng)定期進(jìn)行質(zhì)控菌株檢測,如同時用金黃色葡萄球菌和大腸桿菌作為對照。對于疑似腸道感染患者,除染色檢查外還需結(jié)合糞便培養(yǎng)和藥敏試驗。日常工作中需嚴(yán)格執(zhí)行生物安全規(guī)范,處理含大腸桿菌的標(biāo)本時做好個人防護(hù),廢棄物需高壓滅菌處理。發(fā)現(xiàn)多重耐藥菌株應(yīng)及時上報醫(yī)院感染控制部門。
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